近藤局長派齊藤一到伊東身邊做間諜，獲知伊東將對他不利。於是秘密召集新撰組隊士，計劃暗殺伊東。結果新撰組反而被伊東派傭兵圍殺，陷入絕境。另一方面，鐵之助被誤會為殺死坂本龍馬的罪人，遭到追殺… 另外還有沖田總司童年往事的番外篇。
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